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      論文解讀--草魚呼腸孤病毒抗原表位的篩選及其對草魚的免疫保護評估

      出處:公眾號水生動物健康評估 作者:吳凡 水產養殖網 2019-11-06 10:32:00

      今天跟大家分析一篇文章:草魚呼腸孤病毒抗原表位的篩選及其對草魚的免疫保護評估,文章引用信息如下:
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      草魚呼腸孤病毒(GCRV)引起的出血病對水產養殖業造成了巨大的經濟損失,被認為是對草魚養殖威脅最嚴重的疾病之一。目前,接種疫苗是對抗GCRV感染和提高草魚產量的最有效的方法。本研究將GCRV-II的VP4基因分為4個片段,分別在大腸桿菌中表達,用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)篩選潛在抗原表位,并以碳納米管為載體,研究了其對草魚抗GCRV-II感染的保護作用。

      一、抗原表達與鑒定

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      (A)重組質粒的鑒定;(B)重組蛋白的表達;(C)VP4蛋白的蛋白免疫印跡結果;(D)VP4蛋白片段的蛋白免疫印跡結果

      二、VP4和VP4-3的免疫原性

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      ELISA測定結果顯示VP4-3蛋白的含量最高,表明VP4-3具有最強的抗體結合能力,是GCRV-II的潛在抗原表位。

      三、血清抗體的產生

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      接種后草魚的血清抗體水平

      ELISA結果顯示抗體水平隨著疫苗濃度的增加和免疫時間的延長而增加,每個組的抗體水平在接種后3周達到最高濃度,然后逐漸減弱。此外,SWCNTs-VP4和SWCNTs-VP4-3疫苗接種組的抗體水平顯著高于對照組和VP4組。

      四、疫苗誘導的免疫應答

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      結果表明,與裸露的VP4亞單位疫苗相比,SWCNTs-VP4亞單位疫苗能誘導草魚產生更好的免疫應答。此外,與SWCNTs-VP4組相比,SWCNTs-VP4-3治療組的免疫相關參數水平更高。

      五、免疫基因的表達

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      qRT-PCR分析接種不同疫苗制劑的草魚其免疫相關基因的表達

      六、疫苗的免疫保護率

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      接種草魚的相對存活率

      在感染10天后,SWCNTs-VP4-3處理的草魚存活率為76.7%,而SWCNTs-VP4和對照組的存活率分別為58.3%和0%,顯示疫苗具有較好的免疫保護效果。

      總結
      研究結果表明,與裸露的VP4亞單位疫苗相比,SWCNTs-VP4亞單位疫苗能誘導草魚產生更好的免疫應答。此外,與SWCNTs-VP4組相比,SWCNTs-VP4-3治療組的免疫相關參數水平更高。在感染10天后,SWCNTs-VP4-3處理的草魚存活率為76.7%,而SWCNTs-VP4和對照組的存活率分別為58.3%和0%。這些結果表明SWCNTs-VP4-3可能是預防和控制草魚GCRV-II的一種候選藥物。

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