論文解讀--土霉素對尼羅羅非魚胃腸道微生物生態的抑菌活性 |
| 出處：水生動物健康評估公眾號 作者：提拉皮皮霞 水產養殖網 2020-04-06 22:42:00 |
土霉素(OTC)是四環素家族中的一種廣譜抗生素，與其他抗生素相比成本較低，占歐盟動物生產中抗生素消費的近三分之一。雖然在歐盟和美國不允許使用它作為生長促進劑，但在許多國家仍然允許使用。
對陸生物種腸道微生物的研究，認為腸道中的細菌種群會影響胃腸道病原微生物的分布，有助于免疫系統和器官的發育。本研究的目的是確定飼料中分別添加7天和30天的土霉素對看似健康的尼羅羅非魚胃腸道微生物的影響。
實驗設計如下：
結果
1、水的理化性質的改變
水體的理化參數如溫度、pH、DO、鹽度和電導率是影響環境中細菌豐度的重要因素。因此，在整個實驗期間都對這些參數進行了監測。
溫度大致相似，平均值介于28.3 ± 0.1°C，實驗結束時，T2的水溫略有下降，降至26.3±0.2°C。
pH值為近中性至微堿性，處理前為7.7±0.1，T1期間為7.5±0.1，T2期間為7.5±0.1。
DO處理前平均值為4.37±0.07 mg/L，T1期間為4.41±0.11 mg/L，T2期間為4.35±0.12 mg/L。
水的鹽度和氨含量為0 ppt，平均硬度為110.19±10.02ppm，平均堿度為880.95±60.74ppm。
2、魚腸道細菌豐度及其組成變化
下圖為不同處理條件下尼羅羅非魚腸道中細菌負荷的比較。
如圖可以看到細菌負荷變化較大，T1，T2處理組較對照組均顯著降低。
為了觀察土霉素處理后尼羅羅非魚腸道細菌的變化，使用SS和EMB瓊脂平板計數，所得數據如下圖所示（圖a為T1處理組，圖b為T2處理組）。
T1處理中，SS培養液中的細菌在土霉素處理后第1天顯著下降(P<0.05)，第2天開始急劇上升，第3天達到87.67±34.82 CFU/g，隨后又顯著下降至37.00±20.52 CFU/g，至第7天基本保持不變。在EMB培養基中，腸道細菌數量的變化規律與SS培養基相同。T1組腸道菌群在土霉素處理后第2天和第3天的上升可能與土霉素對對抗生素產生抗藥性的細菌群的初始作用有關。因此，通過輸入抗生素改變了尼羅羅非魚胃腸道細菌的豐度，并且隨著時間的推移，其抵抗力逐漸下降。
T2處理中，SS培養液中的細菌在土霉素處理后第6天顯著降低(P<0.05)，第15天開始急劇上升，達到87.67±34.82 CFU/g，隨后又降至28.67±04.93，至第30天基本保持不變。在EMB培養基中，腸道細菌數量的變化規律與SS培養基相同。T2組腸道菌群在土霉素處理后第15天的上升可能與土霉素對菌群的初始作用有關，菌群試圖抵抗抗生素的作用，因此數量增加，最后隨著時間的推移，其耐藥性下降。
不同處理尼羅羅非魚胃腸道細菌組成百分比的數據如下表所示：
細菌分布比較表明，土霉素處理導致腸道微生物發生變化。共鑒定出10個細菌屬，分別為大腸桿菌、葡萄球菌、腸桿菌、微球菌、假單胞菌、芽孢桿菌、黃桿菌、沙門氏菌、鏈球菌和愛德華氏菌。試驗結束時，土霉素處理組出現一種優勢腸桿菌，占對照組的17.36%，T1組占14.19%，T2組占15.64%。這些結果表明，抗生素處理可以根除敏感微生物，在本研究中，大腸桿菌是最敏感的屬，在所有兩種處理(T1和T2)前后，大腸桿菌都或多或少地下降了52%。
3、魚腸道細菌對抗生素敏感性的變化
對大腸埃希菌、葡萄球菌、假單胞菌和芽孢桿菌等4株菌株進行7種抗菌藥（阿莫西林、環丙沙星、復方新諾明、紅霉素、慶大霉素、呋喃妥因、四環素等7種抗生素）的藥敏試驗。結果如下圖：
結果表明，大腸埃希氏菌、葡萄球菌、假單胞菌和芽孢桿菌對所有7種抗菌藥的敏感性均較高。經過7天和30天的土霉素處理后，所有菌株對抗生素的敏感性均有所提高。
結論
結果表明，在水產養殖設施中使用的土霉素對包括腸道細菌在內的大多數細菌都是有效的，可以成功地應用于商業水產養殖。然而，在使用它們時需要采取足夠的預防措施，因為它可能會導致病原菌產生抗生素耐藥性。
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