今天跟大家分享一篇文章:金銀花各組分在體內外抗石斑魚虹彩病毒活性的研究,文章引用信息如下:
石斑魚虹彩病毒,在養殖石斑魚中致死率較高,因此迫切需要有效的藥物來控制石斑魚虹彩病毒感染。金銀花(L.japonica)是一種著名的藥用植物。本研究從中國廣西的石斑魚中提取了虹彩病毒(SGIV-Gx)并評估了金銀花各組分在抗SGIV-Gx感染中的應用。
金銀花組分效應濃度的確定
通過光鏡觀察和CCK-8溶液測定細胞活性確定了金銀花各組分最安全,適宜的效應濃度。(LAE ≤ 10 mg/mL, CGA ≤ 250 μg/mL,CCGA≤500 μg/mL, IAA ≤ 250 μg/mL, IAB ≤ 250 μg/mL,IAC ≤ 500 μg/mL, CA ≤ 125 μg/mL)
金銀花各組分對雜交石斑魚組織學的影響
腹腔注射金銀花組分10天后的石斑魚,其肝臟和脾臟組織沒有病理變化。
利用核酸適配體Q3熒光分子探針(Q3-AFMP)特異性檢測SGIV-Gx感染
流式細胞儀檢測結果顯示,靶細胞SGIV-Gx的熒光強度隨SGIV-Gx感染時間的延長而增強,表明Q3-AFMP可監測SGIV-Gx的感染過程。
利用光鏡分析金銀花組分抗病毒活性
光鏡觀察發現正常GS細胞無細胞病變作用;SGIV-Gx,SGIV-Gx+CGA,SGIV-Gx+CCGA三組出現大量細胞病變作用;SGIV-Gx與其它各組分(LAE,10mg/mL;IAA,250μg/mL;IAB,250μg/mL;IAC,500μg/mL;CA,125μg/mL;LT,500μg/mL;IS,500μg/mL)共孵育的細胞中出現少量細胞病變作用。
利用Q3-AFMP分析金銀花組分抗病毒活性
實驗結果顯示CGA與CCGA對細胞熒光強度幾乎無影響,其他組分(LAE、IAA、IAB、IAC、CA、LT和IS)使細胞的熒光強度顯著降低,表明這些成分具有抗SGIV-Gx感染的活性。
利用RT-qPCR分析金銀花組分抗病毒活性
實驗結果顯示一些組分(LAE,IAA,IAB,IAC,CA,LT,IS)使MCP基因在GS細胞中的表達顯著下降,這表明這些組分能顯著抑制SGIV-Gx感染。此外,有趣的是,在某些工作濃度下,CGA(62.5-125μg/mL)和CCGA(125-250μg/mL)甚至可以促進MCP基因表達和病毒復制。
金銀花各組分對SGIV-Gx感染的抑制率
根據RT-qPCR的抗病毒活性結果,進一步評價了在安全工作濃度下,各組分對SGIV-Gx感染的抑制率。結果表明,金銀花的組成成分(LAE、IAA、IAB、IAC、CA、LT)對SGIV-Gx感染具有最有效的抗病毒活性。
金銀花組分對SGIV-Gx的體內抗病毒活性
選擇金銀花組分LAE,IAC和LT進行體內抗SGIV-Gx活性評價。各組存活率如圖所示,實驗結果表明金銀花組分在體內對SGIV-Gx感染具有保護作用。   總結: 本研究首先確定了金銀花各組分的安全、適宜效應濃度。然后采用光鏡、Q3-AFMP和RT-qPCR三種方法分析了金銀花各組分對SGIV-Gx感染的抑制作用,結果表明,金銀花部分成分(LAE、IAA、IAB、IAC、CA、LT、IS)對SGIV-Gx感染具有較好的抗病毒活性,抑制率達90%以上。本研究的結果表明,金銀花的成分具有抗病毒作用,金銀花可用于開發防治養殖石斑魚SGIV-Gx感染的有效藥物。
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